γ-干扰素基因pIRES 改进型黄色荧光蛋白载体的构建
【目的】构建携带γ-干扰素基因(ifn-γ)的pIRES 改进型黄色荧光蛋白载体(pIRES-EYFPIFN-γ), 为γ-干扰素基 因的体内外表达及蛋白定位提供理想的标记。【方法】根据已知γ-干扰素基因序列, 设计在目的片段两端分别带EcoRⅤ和 Not Ⅰ 酶切位点序列的2 条引物, 用PCR 技术从质粒pcDNA3IFN-γ中扩增出ifn-γ(499 bp), PCR 产物用EcoRⅤ 和Not Ⅰ 双 酶切后回收纯化, 定向克隆至商品质粒pIRES-EYFP, 重组质粒pIRES-EYFPIFN-γ用限制性内切酶酶切和DNA 序列分析鉴 定。同时以脂质体为介导, 将pIRES-...
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| Main Authors: | , , , , , , |
|---|---|
| Format: | Article |
| Language: | zho |
| Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2002-01-01
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| Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43587395/ |
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