Ghrelin通过JNK信号通路抑制LPS诱导的肺泡巨噬细胞凋亡

Ghrelin通过JNK信号通路抑制LPS诱导的肺泡巨噬细胞凋亡

【目的】 观察体外条件下加入外源性ghrelin对内毒素(LPS)诱导大鼠肺泡巨噬细胞NR8383凋亡以及吞噬能力的影响,并探讨JNK(c-Jun N-terminal kinase)信号通路在其中所起的作用? 【方法】 用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法检测加入LPS或者ghrelin与LPS共孵育后NR8383的细胞毒性;流式细胞技术?原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡率;Western blot检测JNK?phospho-JNK信号通路蛋白以及cleaved caspase-3?Bax?Bcl-2凋亡相关分子蛋白的表达;激光共聚焦技术检测巨噬细胞的吞噬能力;使...

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Bibliographic Details
Format: Article
Language:zho
Published: Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University 2015-01-01
Series:Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban
Subjects:
ghrelin
凋亡
内毒素
肺泡巨噬细胞
c-Jun N-terminal kinase (JNK)
Online Access:http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43572702/
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Description
Summary:【目的】 观察体外条件下加入外源性ghrelin对内毒素(LPS)诱导大鼠肺泡巨噬细胞NR8383凋亡以及吞噬能力的影响,并探讨JNK(c-Jun N-terminal kinase)信号通路在其中所起的作用? 【方法】 用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法检测加入LPS或者ghrelin与LPS共孵育后NR8383的细胞毒性;流式细胞技术?原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡率;Western blot检测JNK?phospho-JNK信号通路蛋白以及cleaved caspase-3?Bax?Bcl-2凋亡相关分子蛋白的表达;激光共聚焦技术检测巨噬细胞的吞噬能力;使用ghrelin受体拮抗剂[D-Lys-3]-GHRP-6?JNK特异性抑制剂SP600125分别抑制ghrelin受体及JNK激酶的激活?【结果】 CCK-8检测结果显示LPS可显著抑制NR8383增殖,而ghrelin可呈浓度依赖性地阻断这种抑制作用;流式和TUNEL检测进一步证实ghrelin可显著降低LPS所致NR8383凋亡作用(P < 0.05),而应用ghrelin受体拮抗剂[D-Lys-3]-GHRP-6可以减弱ghrelin的抗凋亡效果(P < 0.05);LPS可以激活JNK激酶活性,并改变其下游凋亡相关蛋白的表达,其中促凋亡蛋白Bax以及cleaved caspase-3表达上调,抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调,应用ghrelin可以逆转LPS对JNK激酶的激活,继而下调Bax以及cleaved caspase-3的表达,上调Bcl-2的表达,差异均具有统计学意义(P < 0.05); ghrelin还可以维持LPS持续刺激下NR8383的吞噬能力(P < 0.05)? 【结论】 ghrelin通过下调JNK信号通路的激活抑制LPS诱导的NR8383的凋亡,并维持其吞噬能力
ISSN:1672-3554

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