白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株 CYP6 基因 cDNA 片段的克隆与鉴定
【目的】获得白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株 CYP6 基因家族中的一个 cDNA 片段。【方法】根据家蝇 CYP6A1、CYP6D1 以 及致倦库蚊 CYP6E同源区氨基酸序列,设计 1 对简并引物,进行反转录 PCR, 获得一大小与设计的细胞色素 P450 基因片段相 符合的 cDNA 片段。将该片断与 pUC19 质粒重组,并克隆至 JM109 大肠杆菌中,经筛选后测序; 将推导的氨基酸序列进行同源 性分析, 并用 PC/GENE 软件绘制系统树。【结果】获得了 1 条长 240 bp 的核酸序列; 所得序列与昆虫 CYP6 家族的同源性在 36. 3%～ 46. 8%之间,但 CYP6D1 除外...
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| Main Authors: | , |
|---|---|
| Format: | Article |
| Language: | zho |
| Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2000-01-01
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| Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43588617/ |
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| Summary: | 【目的】获得白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株 CYP6 基因家族中的一个 cDNA 片段。【方法】根据家蝇 CYP6A1、CYP6D1 以 及致倦库蚊 CYP6E同源区氨基酸序列,设计 1 对简并引物,进行反转录 PCR, 获得一大小与设计的细胞色素 P450 基因片段相 符合的 cDNA 片段。将该片断与 pUC19 质粒重组,并克隆至 JM109 大肠杆菌中,经筛选后测序; 将推导的氨基酸序列进行同源 性分析, 并用 PC/GENE 软件绘制系统树。【结果】获得了 1 条长 240 bp 的核酸序列; 所得序列与昆虫 CYP6 家族的同源性在 36. 3%～ 46. 8%之间,但 CYP6D1 除外,其同源性为 29. 1%; 而与 CYP4 家族同源性较低, 与 CYP4C1、CYP4D1、CYP4D2 同源性分 别为 33. 3%、32. 9%和 29. 9%; 与哺乳动物 CYP3A 亚家族同源性亦较高; 所绘制的系统树显示出与同源性分析相一致的结果。 【结论】该序列为 CYP6家族中某一成员的结构基因片段。 |
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| ISSN: | 1672-3554 |