小熊猫源犬瘟热病毒DNA疫苗构建及其在真核细胞的表达

根据Gen Bank中发表的犬瘟热病毒(CDV)的基因组序列设计了H和F基因的2对引物,通过RT-PCR扩增出从发病小熊猫分离的CDV的H和F基因,并将其克隆入到18T-simple载体上进行测序。使用<i>Kpn</i> I和<i>Xho</i> I限制性内切酶对重组载体进行双酶切并将目的基因克隆到pcDNA 3.1表达载体上,构建完成后转染293T细胞,转染48 h后,再利用RT-PCR和Western-blot检测目的基因的转录和目的蛋白的表达。结果表明,表达载体经转染后,在293T细胞中,目的基因均能得到转录而且正确表达。这为下一步基因疫...

Full description

Saved in:
Bibliographic Details
Main Author: 张晓明 陈 武 彭仕明
Format: Article
Language:zho
Published: Editorial Department of Chinese Journal of Wildlife 2015-01-01
Series:野生动物学报
Subjects:
Online Access:http://ysdw.nefu.edu.cn/thesisDetails?columnId=67069670&Fpath=home&index=0
Tags: Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
_version_ 1841542070926311424
author 张晓明 陈 武 彭仕明
author_facet 张晓明 陈 武 彭仕明
author_sort 张晓明 陈 武 彭仕明
collection DOAJ
description 根据Gen Bank中发表的犬瘟热病毒(CDV)的基因组序列设计了H和F基因的2对引物,通过RT-PCR扩增出从发病小熊猫分离的CDV的H和F基因,并将其克隆入到18T-simple载体上进行测序。使用<i>Kpn</i> I和<i>Xho</i> I限制性内切酶对重组载体进行双酶切并将目的基因克隆到pcDNA 3.1表达载体上,构建完成后转染293T细胞,转染48 h后,再利用RT-PCR和Western-blot检测目的基因的转录和目的蛋白的表达。结果表明,表达载体经转染后,在293T细胞中,目的基因均能得到转录而且正确表达。这为下一步基因疫苗的研究奠定了良好的基础。
format Article
id doaj-art-fcadd4f3ddb5475ab0cf700244e89e1e
institution Kabale University
issn 2310-1490
language zho
publishDate 2015-01-01
publisher Editorial Department of Chinese Journal of Wildlife
record_format Article
series 野生动物学报
spelling doaj-art-fcadd4f3ddb5475ab0cf700244e89e1e2025-01-14T04:22:05ZzhoEditorial Department of Chinese Journal of Wildlife野生动物学报2310-14902015-01-0127928367069670小熊猫源犬瘟热病毒DNA疫苗构建及其在真核细胞的表达张晓明 陈 武 彭仕明根据Gen Bank中发表的犬瘟热病毒(CDV)的基因组序列设计了H和F基因的2对引物,通过RT-PCR扩增出从发病小熊猫分离的CDV的H和F基因,并将其克隆入到18T-simple载体上进行测序。使用<i>Kpn</i> I和<i>Xho</i> I限制性内切酶对重组载体进行双酶切并将目的基因克隆到pcDNA 3.1表达载体上,构建完成后转染293T细胞,转染48 h后,再利用RT-PCR和Western-blot检测目的基因的转录和目的蛋白的表达。结果表明,表达载体经转染后,在293T细胞中,目的基因均能得到转录而且正确表达。这为下一步基因疫苗的研究奠定了良好的基础。http://ysdw.nefu.edu.cn/thesisDetails?columnId=67069670&Fpath=home&index=0犬瘟热病毒DNA疫苗载体构建真核表达
spellingShingle 张晓明 陈 武 彭仕明
小熊猫源犬瘟热病毒DNA疫苗构建及其在真核细胞的表达
野生动物学报
犬瘟热病毒
DNA疫苗
载体构建
真核表达
title 小熊猫源犬瘟热病毒DNA疫苗构建及其在真核细胞的表达
title_full 小熊猫源犬瘟热病毒DNA疫苗构建及其在真核细胞的表达
title_fullStr 小熊猫源犬瘟热病毒DNA疫苗构建及其在真核细胞的表达
title_full_unstemmed 小熊猫源犬瘟热病毒DNA疫苗构建及其在真核细胞的表达
title_short 小熊猫源犬瘟热病毒DNA疫苗构建及其在真核细胞的表达
title_sort 小熊猫源犬瘟热病毒dna疫苗构建及其在真核细胞的表达
topic 犬瘟热病毒
DNA疫苗
载体构建
真核表达
url http://ysdw.nefu.edu.cn/thesisDetails?columnId=67069670&Fpath=home&index=0
work_keys_str_mv AT zhāngxiǎomíngchénwǔpéngshìmíng xiǎoxióngmāoyuánquǎnwēnrèbìngdúdnayìmiáogòujiànjíqízàizhēnhéxìbāodebiǎodá