抑制微RNA-30d-5p促进线粒体自噬缓解高糖作用下的足细胞损伤
<sec><title>目的</title>探讨微RNA（miR）-30d-5p在高糖诱导下足细胞损伤中的作用。</sec><sec><title>方法</title>采用30 mmol/L葡萄糖诱导足细胞高糖化，使用miR-30d-5p抑制剂和模拟物转染，再经1 mg/mL 3-甲基腺嘌呤（3-MA）处理。定量逆转录聚合酶链反应检测miR-30d-5p的转染效率；流式细胞术检测细胞凋亡；蛋白质印迹法检测肾病蛋白、微管相关蛋白轻链（LC）3Ⅱ/LC3Ⅰ、P62、自噬相关基因（ATG）5蛋白、PTEN诱导假定激酶...
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|---|---|
| Format: | Article |
| Language: | zho |
| Published: |
Zhejiang University Press
2025-01-01
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| Series: | 浙江大学学报. 医学版 |
| Subjects: | |
| Online Access: | https://www.sciengine.com/doi/10.3724/zdxbyxb-2024-0504 |
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|---|---|
| author | 蔡 莹 陈 生 蒋 晓立 邬 启元 郭 蓓 王 芳 |
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| description | <sec><title>目的</title>探讨微RNA（miR）-30d-5p在高糖诱导下足细胞损伤中的作用。</sec><sec><title>方法</title>采用30 mmol/L葡萄糖诱导足细胞高糖化，使用miR-30d-5p抑制剂和模拟物转染，再经1 mg/mL 3-甲基腺嘌呤（3-MA）处理。定量逆转录聚合酶链反应检测miR-30d-5p的转染效率；流式细胞术检测细胞凋亡；蛋白质印迹法检测肾病蛋白、微管相关蛋白轻链（LC）3Ⅱ/LC3Ⅰ、P62、自噬相关基因（ATG）5蛋白、PTEN诱导假定激酶（PINK）1和Parkin基因（PARK2）蛋白表达。JC-1作为荧光探针检测线粒体膜电位，通过相关试剂盒检测细胞中的三磷酸腺苷（ATP）含量。</sec><sec><title>结果</title>在高糖诱导下，足细胞凋亡增加，miR-30d-5p和P62表达上调，肾病蛋白、ATG5、PINK1、PARK2和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达水平降低（均P<0.01）。miR-30d-5p抑制剂部分逆转了高糖对足细胞凋亡以及ATG5、PINK1、PARK2、肾病蛋白、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和P62表达的影响（均P<0.01）。高糖诱导足细胞线粒体膜电位流失、ATP含量减少，抑制miR-30d-5p后能增加膜电位和ATP含量（均P<0.05）。自噬抑制剂3-MA和miR-30d-5p模拟物可逆转miR-30d-5p抑制对高糖诱导的足细胞凋亡、自噬和线粒体功能的影响（均P<0.05）。</sec><sec><title>结论</title>抑制miR-30d-5p可能通过促进ATG5、PINK1、PARK2的表达促进线粒体自噬，进而缓解高糖诱导的足细胞损伤。</sec> |
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| issn | 1008-9292 |
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| publishDate | 2025-01-01 |
| publisher | Zhejiang University Press |
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| series | 浙江大学学报. 医学版 |
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