黏着斑激酶酪氨酸磷酸化在牵拉依赖的细胞形态改变中的作用
【目的】探讨黏着斑激酶(FAK)397 和925 位酪氨酸残基(Y397 , Y925)酪氨酸磷酸化在单轴周期性牵拉引起的 细胞形态改变(垂直于牵拉轴方向排列和伸长)中的作用。【方法】用含100 mL/ L 胎牛血清的DMEM 培养大鼠成纤维细胞 3Y1 。利用PCR 法从人的脐静脉内皮细胞获得FAK cDNA 。通过直接点突变, 利用重叠PCR 制成突变的FAK(F397Y, F925Y)。将FAK 突变转染到细胞内, 使细胞遭受牵拉, 牵拉0 min 为对照组, 牵拉5 、10、20 、30、60 min 为牵拉组, 实验重复3 次, 实验数据利用方差分析和多重比较进行分析。然后利...
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| Main Authors: | , , |
|---|---|
| Format: | Article |
| Language: | zho |
| Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2002-01-01
|
| Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43585776/ |
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|---|---|
| author | 王连荣 王菊光 吴伟康 |
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| author_sort | 王连荣 |
| collection | DOAJ |
| description | 【目的】探讨黏着斑激酶(FAK)397 和925 位酪氨酸残基(Y397 , Y925)酪氨酸磷酸化在单轴周期性牵拉引起的
细胞形态改变(垂直于牵拉轴方向排列和伸长)中的作用。【方法】用含100 mL/ L 胎牛血清的DMEM 培养大鼠成纤维细胞
3Y1 。利用PCR 法从人的脐静脉内皮细胞获得FAK cDNA 。通过直接点突变, 利用重叠PCR 制成突变的FAK(F397Y,
F925Y)。将FAK 突变转染到细胞内, 使细胞遭受牵拉, 牵拉0 min 为对照组, 牵拉5 、10、20 、30、60 min 为牵拉组, 实验重复3
次, 实验数据利用方差分析和多重比较进行分析。然后利用FAKY397 和Y925 磷酸化的特殊抗体进行了免疫印迹实验, 采用
信息分析程序(Mocha , Jandel Scientific)测定免疫印迹的密度, 比较对照组与牵拉组, 检测FAK 酪氨酸磷酸化, 分析细胞形态
改变。【结果】在牵拉反应中, FAKY397 和Y925 的酪氨酸磷酸化水平比对照组明显增高(P <0.05), 并且峰值分别在牵拉
后5 min(2.75±0.51 倍, n =3)和20 min(2.98 ±0.58 倍, n =3)。另一方面, 在突变FAK 转染的细胞中, 牵拉引起的细胞
形态改变被有意义的阻滞了。【结论】牵拉引起的FAK 酪氨酸磷酸化在牵拉依赖的细胞形态改变中起着重要作用。 |
| format | Article |
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| institution | Kabale University |
| issn | 1672-3554 |
| language | zho |
| publishDate | 2002-01-01 |
| publisher | Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University |
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| series | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| spelling | doaj-art-e30d03bb02ea496b86032c17877f19332025-01-15T03:34:16ZzhoEditorial Office of Journal of Sun Yat-sen UniversityZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban1672-35542002-01-012343585776黏着斑激酶酪氨酸磷酸化在牵拉依赖的细胞形态改变中的作用王连荣王菊光吴伟康【目的】探讨黏着斑激酶(FAK)397 和925 位酪氨酸残基(Y397 , Y925)酪氨酸磷酸化在单轴周期性牵拉引起的 细胞形态改变(垂直于牵拉轴方向排列和伸长)中的作用。【方法】用含100 mL/ L 胎牛血清的DMEM 培养大鼠成纤维细胞 3Y1 。利用PCR 法从人的脐静脉内皮细胞获得FAK cDNA 。通过直接点突变, 利用重叠PCR 制成突变的FAK(F397Y, F925Y)。将FAK 突变转染到细胞内, 使细胞遭受牵拉, 牵拉0 min 为对照组, 牵拉5 、10、20 、30、60 min 为牵拉组, 实验重复3 次, 实验数据利用方差分析和多重比较进行分析。然后利用FAKY397 和Y925 磷酸化的特殊抗体进行了免疫印迹实验, 采用 信息分析程序(Mocha , Jandel Scientific)测定免疫印迹的密度, 比较对照组与牵拉组, 检测FAK 酪氨酸磷酸化, 分析细胞形态 改变。【结果】在牵拉反应中, FAKY397 和Y925 的酪氨酸磷酸化水平比对照组明显增高(P <0.05), 并且峰值分别在牵拉 后5 min(2.75±0.51 倍, n =3)和20 min(2.98 ±0.58 倍, n =3)。另一方面, 在突变FAK 转染的细胞中, 牵拉引起的细胞 形态改变被有意义的阻滞了。【结论】牵拉引起的FAK 酪氨酸磷酸化在牵拉依赖的细胞形态改变中起着重要作用。http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43585776/ |
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