羽翈中DNA和糖皮质激素共提取技术的研究

羽毛是鸟类研究、监测和管理中常用的非损伤性材料,可从中提取DNA和激素进行遗传和生理分析。然而,作为高度角化的组织,羽翈中的DNA和激素含量极低,提取较为困难。本研究开发一种能够从羽翈中同时提取总DNA和糖皮质激素的方法,命名为DH-CoEx。以丹顶鹤(<italic>Grus japonensis</italic>)、绿孔雀(<italic>Pavo muticu</italic>s)为代表的大型鸟类廓羽、尾上覆羽和以栗鹀(<italic>Emberiza rutila</italic>)、小鹀(<italic&g...

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Main Authors: 于梦佳, 刘思霞, 周雨, 张馨元, 任晓彤, 周永恒, 杨守庄, 李志刚, 徐艳春, 杨淑慧
Format: Article
Language:zho
Published: Editorial Department of Chinese Journal of Wildlife 2024-11-01
Series:野生动物学报
Subjects:
Online Access:http://ysdw.nefu.edu.cn/thesisDetails#10.12375/ysdwxb.20240413
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Description
Summary:羽毛是鸟类研究、监测和管理中常用的非损伤性材料,可从中提取DNA和激素进行遗传和生理分析。然而,作为高度角化的组织,羽翈中的DNA和激素含量极低,提取较为困难。本研究开发一种能够从羽翈中同时提取总DNA和糖皮质激素的方法,命名为DH-CoEx。以丹顶鹤(<italic>Grus japonensis</italic>)、绿孔雀(<italic>Pavo muticu</italic>s)为代表的大型鸟类廓羽、尾上覆羽和以栗鹀(<italic>Emberiza rutila</italic>)、小鹀(<italic>E.pusilla</italic>)为代表的小型鸟类飞羽、绒羽进行测试和评估。结果显示:DH-CoEx能有效从完全角化的羽翈中同时提取出总DNA及糖皮质激素(皮质醇);从5 mg样本中提取的线粒体DNA(mtDNA)拷贝数达到10<sup>4</sup>量级,可支持长达1 350 bp的片段扩增;所提取的核DNA(nuDNA)质量足以进行长达200 bp的微卫星等位基因分型,成功率为98.11% ~ 99.60%;提取的皮质醇含量达到了传统单一提取激素方法的水平,足以进行相关生理学分析。以上结果说明,DH-CoEx是一种简易、高效和适用性广泛的方法,实现了角化材料总DNA和糖皮质激素的共提取,可以支持mtDNA和微卫星等分子标记的分析和应激激素的分析,极大地提高了羽毛的利用率,具有广泛的应用潜力。
ISSN:2310-1490