基于ＤＥＮＶ－ｐｒＭ／Ｅ基因构建ＤＥＮＶ－ＶＬＰ及其免疫学特性
摘 要：【目的】 构建和表达登革病毒４型病毒样颗粒，初步研究其免疫学特性。【方法】 用ＲＴ－ＰＣＲ法扩增ＤＥＮＶ４－ｐｒＭ／Ｅ基因，构建重组质粒ｐＧＡＰＺ－ｓｐｒＭ／Ｅ－Ｄ４，转化Ｘ３３酵母菌株，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ鉴定目的蛋白表达。切片电镜检测病毒样颗粒，蔗糖密度梯度离心纯化。免疫三组Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠，每组１５只。采用间接ＥＬＩＳＡ检测抗原特异性抗体，间接免疫荧光法检测免疫血清与天然病毒粒子的结合，流式细胞术分析小鼠脾淋巴细胞表型，酶联免疫斑点法（ＥＬＩＳＰＯＴ）检测脾分泌ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α和ＩＬ－１０的细胞。【结果】重组质粒在酵母中以病毒样颗粒形式表达，为直径２０...
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| Format: | Article |
|---|---|
| Language: | zho |
| Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2014-01-01
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| Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43574356/ |
| Tags: |
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