DESENVOLVIMENTO E IMPLEMENTAÇÃO DO BIOBANCO HEMOCENTRO-RP
Objetivos: O sucesso no desenvolvimento de novas abordagens de medicina de precisão depende diretamente da disponibilidade de grandes coortes que possuam qualidade excepcional das amostras biológicas. Neste contexto, a automação permite que um grande número de amostras seja processado, garantindo a...
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|---|---|
| Format: | Article |
| Language: | English |
| Published: |
Elsevier
2024-10-01
|
| Series: | Hematology, Transfusion and Cell Therapy |
| Online Access: | http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2531137924024842 |
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|---|---|
| author | LM Lima MES Santos PEG Prates DT Covas RA Panepucci |
| author_facet | LM Lima MES Santos PEG Prates DT Covas RA Panepucci |
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| collection | DOAJ |
| description | Objetivos: O sucesso no desenvolvimento de novas abordagens de medicina de precisão depende diretamente da disponibilidade de grandes coortes que possuam qualidade excepcional das amostras biológicas. Neste contexto, a automação permite que um grande número de amostras seja processado, garantindo a qualidade e a rastreabilidade, além de reduzir custos. Nesse sentido, o objetivo deste trabalho é descrever o estabelecimento da infraestrutura e dos processos de automação do Biobanco do Hemocentro-RP. Materiais e métodos: Tendo em vista a possibilidade futura de acessarmos centenas de amostras de sangue diariamente dos ambulatórios de hematologia (excedentes de hemogramas), adotamos um Robô Pipetador easyBlood STARlet (Hamilton), capaz de identificar e alíquotar as frações de plasma, buffy-coat, e hemácias. Especificamente, a partir de um tubo de EDTA, duas alíquotas de 1mL de plasma são transferidas para criotubos CryoKing (Biologix) contendo códigos matriciais (2D) impressos de fábrica em sua base. Os racks de criotubos são escaneados previamente, gerando um mapa com a posição e o código de cada criotubo. Assim, o robô escaneia os códigos de barras dos tubos de sangue e os associa ao código dos criotubos de destino. Por sua vez, o buffy-coat é transferido para uma placa, que é transferida para um equipamento de extração automatizada de DNA (Extracta, LOCCUS). A placa com o DNA eluido tem uma pequena alíquota transferida pelo robô para uma placa de 384 poços UV-transparente, permitindo sua quantificação em um leitor de placas Varioskan (Thermo). Com base nestes dados, o software de gerenciamento de amostras NorayBanks (NorayBio) importa e cadastra automaticamente as diferentes alíquotas derivadas de cada uma das amostras de sangue dos pacientes. Os valores de absorbância, assim como a quantificação e as razoes de pureza podem ser associadas a cada uma das amostras de DNA armazenadas nas placas (ou transferidas posteriormente para criotubos de 300 ul). Resultados: Os equipamentos de processamento e extração automatizada mencionados foram instalados na estrutura do Biobanco, e encontram-se em fase de testes e padronização. O Robô Pipetador possui racks que permitem o processamento de até 48 tubos de sangue por hora em uma única corrida, permitindo que até 384 amostras sejam fracionadas e aliquotadas por dia (8h) pelo Robô. O plasma e os ácidos nucleicos são armazenados em freezer CryoCube Eppendorf - 80°C (com capacidade para 62.208 amostras), enquanto as células mononucleares isoladas por Ficoll-Paque são criopreservadas em um tanque de nitrogênio líquido para 4800 amostras (Taylor-Wharton). Discussão: A aplicação dos Termos de Consentimento Livre-Esclaredos (TCLEs) está em andamento nos ambulatórios do HC-FMRP e do Hemocentro. Com a implementação de TCLEs digitais na plataforma REDCap, e com sua integração ao sistema informatizado do hospital (sinalizando a necessidade da coleta de tubos adicionais de sangue), esperamos agilizar a coleta de sangue para o Biobanco. Amostras de neoplasias hematológicas, bem como os dados clínicos e laboratoriais associados, vêm sendo coletadas e processadas, visando a avaliação futura de um ensaio de medicina de precisão funcional. Conclusão: O estabelecimento do biobanco terá um papel crucial para o avanço sistemáticona área da pesquisa clínica e translacional e na elaboração futura de ações de atenção oncológica. |
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| issn | 2531-1379 |
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| publisher | Elsevier |
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