随机引物PCR 检测人DNA 指纹条件的优化
【目的】探讨随机引物PCR 检测人DNA 指纹技术的最优化条件。【方法】应用随机引物PCR 技术, 用一对经筛 选的短引物, 对扩增人DNA 指纹的条件进行了优化。【结果】实验结果显示:DNA 模板应新鲜, 质量浓度在50 ～ 550 mg/ L 均 有扩增产物。dNTP 的浓度0.2 mmo l/ L 最宜。Mg2 +浓度5.0 mmol/ L 效果最佳。循环参数以两个三步PCR, 变性温度分别 用94 ℃、90 ℃, 时间各为30 s, 退火温度用43 ℃、48 ℃, 时间分别为40 s 、50 s, 延伸温度用72 ℃, 时间分别为1 min、1 min 20 s 。【结论】按照...
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| Main Authors: | , |
|---|---|
| Format: | Article |
| Language: | zho |
| Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2001-01-01
|
| Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43587566/ |
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|---|---|
| author | 童大跃 伍新尧 |
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| author_sort | 童大跃 |
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| description | 【目的】探讨随机引物PCR 检测人DNA 指纹技术的最优化条件。【方法】应用随机引物PCR 技术, 用一对经筛
选的短引物, 对扩增人DNA 指纹的条件进行了优化。【结果】实验结果显示:DNA 模板应新鲜, 质量浓度在50 ～ 550 mg/ L 均
有扩增产物。dNTP 的浓度0.2 mmo l/ L 最宜。Mg2 +浓度5.0 mmol/ L 效果最佳。循环参数以两个三步PCR, 变性温度分别
用94 ℃、90 ℃, 时间各为30 s, 退火温度用43 ℃、48 ℃, 时间分别为40 s 、50 s, 延伸温度用72 ℃, 时间分别为1 min、1 min 20
s 。【结论】按照优化的实验条件, 得出的DNA 指纹图重复性好, 个体特异性高, 为APHDF 的推广提供了实验基础。 |
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| institution | Kabale University |
| issn | 1672-3554 |
| language | zho |
| publishDate | 2001-01-01 |
| publisher | Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University |
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| series | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| spelling | doaj-art-b8d747ce128248ef856fef6438a945682025-01-15T03:34:38ZzhoEditorial Office of Journal of Sun Yat-sen UniversityZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban1672-35542001-01-012243587566随机引物PCR 检测人DNA 指纹条件的优化童大跃伍新尧【目的】探讨随机引物PCR 检测人DNA 指纹技术的最优化条件。【方法】应用随机引物PCR 技术, 用一对经筛 选的短引物, 对扩增人DNA 指纹的条件进行了优化。【结果】实验结果显示:DNA 模板应新鲜, 质量浓度在50 ～ 550 mg/ L 均 有扩增产物。dNTP 的浓度0.2 mmo l/ L 最宜。Mg2 +浓度5.0 mmol/ L 效果最佳。循环参数以两个三步PCR, 变性温度分别 用94 ℃、90 ℃, 时间各为30 s, 退火温度用43 ℃、48 ℃, 时间分别为40 s 、50 s, 延伸温度用72 ℃, 时间分别为1 min、1 min 20 s 。【结论】按照优化的实验条件, 得出的DNA 指纹图重复性好, 个体特异性高, 为APHDF 的推广提供了实验基础。http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43587566/ |
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