siRNA对VEGFR2的表达抑制及对HL60细胞和人内皮细胞的影响
【目的】为探索治疗白血病的新思路研究了小干扰RNA(siRNA)对肿瘤细胞株HL60和人血管内皮细胞(EC)株EA·hy926血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)基因表达的抑制作用。【方法】制备并筛选VEGFR2基因的最有效siRNA,并据此设计shRNA寡核苷酸链,构建pENTR^TM/U6干扰表达载体。瞬时转染细胞.采用MTF法、RT-PCR法及Western blot测定VEGFR2表达抑制情况。【结果】VEGFR2 siRNAa、b、c抑制HL60细胞效率分别为77.5%、45.0%、80.9%,以siRNAc最高,利用其shRNA和pENTR^TM/U6构建的入门克隆转染HL6...
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| Main Authors: | , , , , , |
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| Format: | Article |
| Language: | zho |
| Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2006-01-01
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| Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| Subjects: | |
| Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43585261/ |
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| author | 郭海霞 薛红漫 夏焱 徐令 徐宏贵 李文益 |
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| description | 【目的】为探索治疗白血病的新思路研究了小干扰RNA(siRNA)对肿瘤细胞株HL60和人血管内皮细胞(EC)株EA·hy926血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)基因表达的抑制作用。【方法】制备并筛选VEGFR2基因的最有效siRNA,并据此设计shRNA寡核苷酸链,构建pENTR^TM/U6干扰表达载体。瞬时转染细胞.采用MTF法、RT-PCR法及Western blot测定VEGFR2表达抑制情况。【结果】VEGFR2 siRNAa、b、c抑制HL60细胞效率分别为77.5%、45.0%、80.9%,以siRNAc最高,利用其shRNA和pENTR^TM/U6构建的入门克隆转染HL60,抑制细胞效率达99.1%;此入门克隆对VEGF&基因mRNA和蛋白的表达抑制在HL60和EA·hy926细胞均显著。【结论】在体外shRNA表达载体可有效抑制HL60细胞VEGFR2自分泌和旁分泌,有效抑制白血病细胞生长。 |
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| publishDate | 2006-01-01 |
| publisher | Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University |
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| series | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
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