Estandarización de zimosán opsonizado como estímulo en la técnica de la 1,2,3-dihidrorrodamina para evaluar el estallido respiratorio del neutrófilo
Introducción. La enfermedad granulomatosa crónica es un defecto de la fagocitosis por deficiencia de gp91phox, p22phox, p47phox, p40phox y p67phox (forma clásica). Recientemente, se describió la deficiencia de EROS y p40phox como responsables de la forma no clásica. La técnica de oxidación de la 1,2...
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| Format: | Article |
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| Published: |
Instituto Nacional de Salud
2024-12-01
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| Series: | Biomédica: revista del Instituto Nacional de Salud |
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| Online Access: | https://revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/7461 |
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| author | Uriel Pérez-Blanco Jenniffer Yissel Girón Guillermo Juárez -Vega María Jiménez Carlos Sánchez Ricardo Rioja Sara Espinosa-Padilla Lizbeth Blancas-Galicia |
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| description | Introducción. La enfermedad granulomatosa crónica es un defecto de la fagocitosis por deficiencia de gp91phox, p22phox, p47phox, p40phox y p67phox (forma clásica). Recientemente, se describió la deficiencia de EROS y p40phox como responsables de la forma no clásica. La técnica de oxidación de la 1,2,3-dihidrorrodamina –usando como estímulo el forbol-12-miristato-13-acetato– se utiliza para el diagnóstico de la enfermedad granulomatosa crónica clásica. Sin embargo, para la detección de la oxidación mediada por EROS y p40phox, se requiere de otros estímulos como zimosán, Escherichia coli o Staphylococcus aureus.
Objetivo. Estandarizar el estímulo con zimosán en la técnica de la 1,2,3-dihidrorrodamina para evaluar el estallido respiratorio del neutrófilo.
Materiales y métodos. Se obtuvo sangre de cinco sujetos sanos previo consentimiento informado. Se utilizó la técnica de 1,2,3-dihidrorrodamina usando el forbol-12-miristato-13-acetato como control y diferentes cantidades de zimosán opsonizado (150, 100, 50, 20 y 10 μg). Por citometría de flujo, se obtuvo la intensidad de fluorescencia media de la rodamina 1,2,3 en las poblaciones de neutrófilos y se calculó el índice de oxidación. Se utilizaron las pruebas de Kolmogorov-Smirnov, ANOVA y el análisis post-hoc de Tukey. Se consideró un valor de p ≤ 0,05 como estadísticamente significativo.
Resultados. El forbol-12-miristato-13-acetato incrementó la intensidad de la fluorescencia media de la rodamina 1,2,3 en los sujetos sanos. Entre las diferentes condiciones de zimosán probadas, la de 50 μg fue la cantidad óptima y reproducible en todos los controles por el análisis estadístico y los hallazgos citométricos.
Conclusiones. Se presenta la optimización de la técnica 1,2,3-dihidrorrodamina empleando el zimosán como estímulo. |
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| institution | Kabale University |
| issn | 0120-4157 |
| language | English |
| publishDate | 2024-12-01 |
| publisher | Instituto Nacional de Salud |
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| series | Biomédica: revista del Instituto Nacional de Salud |
| spelling | doaj-art-77c8814de8dc48d982c0c10adb9930982025-01-21T18:56:10ZengInstituto Nacional de SaludBiomédica: revista del Instituto Nacional de Salud0120-41572024-12-0144Sp. 219820810.7705/biomedica.74618916Estandarización de zimosán opsonizado como estímulo en la técnica de la 1,2,3-dihidrorrodamina para evaluar el estallido respiratorio del neutrófiloUriel Pérez-Blanco0https://orcid.org/0009-0000-2156-2166Jenniffer Yissel Girón1https://orcid.org/0000-0001-7027-9615Guillermo Juárez -Vega2https://orcid.org/0000-0002-0633-0567María Jiménez3https://orcid.org/0009-0004-1437-5214Carlos Sánchez4https://orcid.org/0009-0007-6263-442XRicardo Rioja5https://orcid.org/0000-0003-1894-2525Sara Espinosa-Padilla6https://orcid.org/0000-0003-4859-3151Lizbeth Blancas-Galicia7https://orcid.org/0000-0002-3861-8864Laboratorio de Inmunodeficiencias, Instituto Nacional de Pediatría, Ciudad de México, MéxicoRed de Apoyo a la Investigación, Coordinación de la Investigación Científica, Instituto Nacional de Ciencias Médicas y Nutrición Salvador Zubirán, Universidad Nacional Autónoma de México, Ciudad de México, MéxicoRed de Apoyo a la Investigación, Coordinación de la Investigación Científica, Instituto Nacional de Ciencias Médicas y Nutrición Salvador Zubirán, Universidad Nacional Autónoma de México, Ciudad de México, MéxicoLaboratorio de Inmunodeficiencias, Instituto Nacional de Pediatría, Ciudad de México, MéxicoLaboratorio de Inmunodeficiencias, Instituto Nacional de Pediatría, Ciudad de México, MéxicoLaboratorio de Inmunodeficiencias, Instituto Nacional de Pediatría, Ciudad de México, MéxicoLaboratorio de Inmunodeficiencias, Instituto Nacional de Pediatría, Ciudad de México, MéxicoLaboratorio de Inmunodeficiencias, Instituto Nacional de Pediatría, Ciudad de México, MéxicoIntroducción. La enfermedad granulomatosa crónica es un defecto de la fagocitosis por deficiencia de gp91phox, p22phox, p47phox, p40phox y p67phox (forma clásica). Recientemente, se describió la deficiencia de EROS y p40phox como responsables de la forma no clásica. La técnica de oxidación de la 1,2,3-dihidrorrodamina –usando como estímulo el forbol-12-miristato-13-acetato– se utiliza para el diagnóstico de la enfermedad granulomatosa crónica clásica. Sin embargo, para la detección de la oxidación mediada por EROS y p40phox, se requiere de otros estímulos como zimosán, Escherichia coli o Staphylococcus aureus. Objetivo. Estandarizar el estímulo con zimosán en la técnica de la 1,2,3-dihidrorrodamina para evaluar el estallido respiratorio del neutrófilo. Materiales y métodos. Se obtuvo sangre de cinco sujetos sanos previo consentimiento informado. Se utilizó la técnica de 1,2,3-dihidrorrodamina usando el forbol-12-miristato-13-acetato como control y diferentes cantidades de zimosán opsonizado (150, 100, 50, 20 y 10 μg). Por citometría de flujo, se obtuvo la intensidad de fluorescencia media de la rodamina 1,2,3 en las poblaciones de neutrófilos y se calculó el índice de oxidación. Se utilizaron las pruebas de Kolmogorov-Smirnov, ANOVA y el análisis post-hoc de Tukey. Se consideró un valor de p ≤ 0,05 como estadísticamente significativo. Resultados. El forbol-12-miristato-13-acetato incrementó la intensidad de la fluorescencia media de la rodamina 1,2,3 en los sujetos sanos. Entre las diferentes condiciones de zimosán probadas, la de 50 μg fue la cantidad óptima y reproducible en todos los controles por el análisis estadístico y los hallazgos citométricos. Conclusiones. Se presenta la optimización de la técnica 1,2,3-dihidrorrodamina empleando el zimosán como estímulo.https://revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/7461enfermedad granulomatosa crónicarodamina 1,2,3zimosánnadph oxidasa |
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