人血管内皮生长因子的克隆表达及活性鉴定
【目的】克隆人血管内皮生长因子165 基因, 并测定蛋白质的表达及鉴定其活性。【方法】用PCR 法从人心脏 cDNA 文库中钓取目的基因VEGF165 , 插入质粒PUC19 中并测序鉴定。构建真核表达重组质粒AdtrackCMV-VEGF165 转染 293 细胞, 用RNA 斑点杂交和Wester n blot 方法检测VEGF165 基因表达, 并通过Miles 试验检测VEGF165 蛋白活性。【结 果】PCR 产物为582 bp , 测序结果表明其序列正确, 在RNA 和蛋白水平检测到VEGF165 基因表达, VEGF165 蛋白相对分子 质量为22 ku , 具有生物学活...
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| Main Authors: | , |
|---|---|
| Format: | Article |
| Language: | zho |
| Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2001-01-01
|
| Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| Subjects: | |
| Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43586462/ |
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|---|---|
| author | 李子俊 余细勇 |
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| author_sort | 李子俊 |
| collection | DOAJ |
| description | 【目的】克隆人血管内皮生长因子165 基因, 并测定蛋白质的表达及鉴定其活性。【方法】用PCR 法从人心脏
cDNA 文库中钓取目的基因VEGF165 , 插入质粒PUC19 中并测序鉴定。构建真核表达重组质粒AdtrackCMV-VEGF165 转染
293 细胞, 用RNA 斑点杂交和Wester n blot 方法检测VEGF165 基因表达, 并通过Miles 试验检测VEGF165 蛋白活性。【结
果】PCR 产物为582 bp , 测序结果表明其序列正确, 在RNA 和蛋白水平检测到VEGF165 基因表达, VEGF165 蛋白相对分子
质量为22 ku , 具有生物学活性。【结论】成功地克隆了有表达生物学活性的VEGF165 基因。 |
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| institution | Kabale University |
| issn | 1672-3554 |
| language | zho |
| publishDate | 2001-01-01 |
| publisher | Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University |
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| series | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| spelling | doaj-art-67eb11ed525e486e9deadb4efd156e632025-01-15T03:34:31ZzhoEditorial Office of Journal of Sun Yat-sen UniversityZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban1672-35542001-01-012243586462人血管内皮生长因子的克隆表达及活性鉴定李子俊余细勇【目的】克隆人血管内皮生长因子165 基因, 并测定蛋白质的表达及鉴定其活性。【方法】用PCR 法从人心脏 cDNA 文库中钓取目的基因VEGF165 , 插入质粒PUC19 中并测序鉴定。构建真核表达重组质粒AdtrackCMV-VEGF165 转染 293 细胞, 用RNA 斑点杂交和Wester n blot 方法检测VEGF165 基因表达, 并通过Miles 试验检测VEGF165 蛋白活性。【结 果】PCR 产物为582 bp , 测序结果表明其序列正确, 在RNA 和蛋白水平检测到VEGF165 基因表达, VEGF165 蛋白相对分子 质量为22 ku , 具有生物学活性。【结论】成功地克隆了有表达生物学活性的VEGF165 基因。http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43586462/内皮生长因子/克隆/分子/基因表达 |
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