牛pcDNA3-bFGF 真核表达重组体的构建与鉴定
【目的】构建并鉴定牛碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因真核表达质粒。【方法】设计含EcoRⅠ 和Xho Ⅰ 酶 切位点的bFGF cDNA 引物, 采用PCR 法从原核pET3c-bFGF 中扩增bFGF cDNA 片段, 纯化PCR 产物, EcoR Ⅰ 和Xho Ⅰ 双酶 切并连接至pcDNA3 , 转化感受态大肠杆菌DH5α, 酶切鉴定阳性重组子, 并进行序列测定。【结果】经PCR 能扩增出483 bp 的片段, 与预期片段大小相符, 构建的重组体经酶切鉴定能切出插入片段, 测序结果与预期序列完全一致。【结论】成功构建 了牛bFGF 真核表达重组体bFGF-pcDNA3 。...
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| Main Authors: | , |
|---|---|
| Format: | Article |
| Language: | zho |
| Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2002-01-01
|
| Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43587443/ |
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|---|---|
| author | 徐 霖 曹开源 |
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| author_sort | 徐 霖 |
| collection | DOAJ |
| description | 【目的】构建并鉴定牛碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因真核表达质粒。【方法】设计含EcoRⅠ 和Xho Ⅰ 酶
切位点的bFGF cDNA 引物, 采用PCR 法从原核pET3c-bFGF 中扩增bFGF cDNA 片段, 纯化PCR 产物, EcoR Ⅰ 和Xho Ⅰ 双酶
切并连接至pcDNA3 , 转化感受态大肠杆菌DH5α, 酶切鉴定阳性重组子, 并进行序列测定。【结果】经PCR 能扩增出483 bp
的片段, 与预期片段大小相符, 构建的重组体经酶切鉴定能切出插入片段, 测序结果与预期序列完全一致。【结论】成功构建
了牛bFGF 真核表达重组体bFGF-pcDNA3 。 |
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| institution | Kabale University |
| issn | 1672-3554 |
| language | zho |
| publishDate | 2002-01-01 |
| publisher | Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University |
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| series | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| spelling | doaj-art-6700239e9ebb41628ebfe1d9495d63ca2025-01-15T03:33:18ZzhoEditorial Office of Journal of Sun Yat-sen UniversityZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban1672-35542002-01-012343587443牛pcDNA3-bFGF 真核表达重组体的构建与鉴定徐 霖曹开源【目的】构建并鉴定牛碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因真核表达质粒。【方法】设计含EcoRⅠ 和Xho Ⅰ 酶 切位点的bFGF cDNA 引物, 采用PCR 法从原核pET3c-bFGF 中扩增bFGF cDNA 片段, 纯化PCR 产物, EcoR Ⅰ 和Xho Ⅰ 双酶 切并连接至pcDNA3 , 转化感受态大肠杆菌DH5α, 酶切鉴定阳性重组子, 并进行序列测定。【结果】经PCR 能扩增出483 bp 的片段, 与预期片段大小相符, 构建的重组体经酶切鉴定能切出插入片段, 测序结果与预期序列完全一致。【结论】成功构建 了牛bFGF 真核表达重组体bFGF-pcDNA3 。http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43587443/ |
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