山东省某地鹦鹉喙羽病病毒的全基因组序列及对SPF鸡胚的致病性探究
2017年4月，山东省某鹦鹉场发生疑似喙羽病感染，鹦鹉出现异形喙和羽毛脱落，甚至急性猝死。目的：了解该地区鹦鹉喙羽病病毒（Psittacine beak and feather disease，PBFD）的流行现状、分子生物学特征和遗传变异规律，为PBFDV的防控提供参考依据。方法：收集怀疑有喙羽病病毒（PBFDV）感染的非洲灰鹦鹉的新鲜肝脏组织和羽毛样本，根据PBFDV全基因组序列设计特异性引物，从患病灰鹦鹉肝脏和羽毛组织中扩增PBFDV的全基因组序列，克隆到pMD19T载体中，经测序获得PBFDV全长cDNA序列，利用DNAstar软件对全基因组进行遗传变异分析。由于目前尚未发现适合PB...
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| Main Author: | |
|---|---|
| Format: | Article |
| Language: | zho |
| Published: |
Editorial Department of Chinese Journal of Wildlife
2019-01-01
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| Series: | 野生动物学报 |
| Subjects: | |
| Online Access: | http://ysdw.nefu.edu.cn/thesisDetails?columnId=67059657&Fpath=home&index=0 |
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| author | 吴少鹏宋艳孙淑红 |
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| description | 2017年4月，山东省某鹦鹉场发生疑似喙羽病感染，鹦鹉出现异形喙和羽毛脱落，甚至急性猝死。目的：了解该地区鹦鹉喙羽病病毒（Psittacine beak and feather disease，PBFD）的流行现状、分子生物学特征和遗传变异规律，为PBFDV的防控提供参考依据。方法：收集怀疑有喙羽病病毒（PBFDV）感染的非洲灰鹦鹉的新鲜肝脏组织和羽毛样本，根据PBFDV全基因组序列设计特异性引物，从患病灰鹦鹉肝脏和羽毛组织中扩增PBFDV的全基因组序列，克隆到pMD19T载体中，经测序获得PBFDV全长cDNA序列，利用DNAstar软件对全基因组进行遗传变异分析。由于目前尚未发现适合PBFDV繁殖的培养细胞或胚胎，我们尝试使用患病鹦鹉的羽毛研磨液注入7日龄SPF鸡胚的卵黄膜中。结果：分离到3株PBFDV（GenBank登录号：MH279594，MH180298和MH190788），全基因组序列测序后，发现它们彼此具有933%—999%的相似性，并且它们也与GenBank中的一些参考序列具有86.1%—98.8%的相似性。卵黄囊注射病毒液后胚胎发育变缓，48—72 h内鸡胚死亡，全身出血。接着我们收集鸡胚的肝组织的研磨液在鸡胚上传代至第5代，均能使鸡胚死亡。提取来自每一代鸡胚肝组织的DNA都可以通过PCR扩增出PBFDV的目的条带。结论：以上实验结果表明，成功从患病鹦鹉体内克隆出PBFDV的全基因，并完成了序列分析，同时PBFDV接种鸡胚卵黄膜后成功复制。我们针对在该地区新出现的病毒从分子方面进行相关研究，分析其遗传变异特征，以研究该病毒与其他地区喙羽病病毒之间的亲缘关系，这些数据为研究该病毒的遗传变异和流行病学提供分子生物学依据。 |
| format | Article |
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| institution | Kabale University |
| issn | 2310-1490 |
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| publishDate | 2019-01-01 |
| publisher | Editorial Department of Chinese Journal of Wildlife |
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