تولید مولکول نوترکیب پروتئینHTLV-1 -پروتئاز متصل به Fcγ1 از IgG1 انسانی (HTLV-1 protease:hFcγ1) با هدف درمان بیماریهای وابسته به HTLV-1
مقاله پژوهشی مقدمه: شمال شرق ایران به عنوان منطقهی بومی ویروس HTLV-1 شناخته شده است. با توجه به افزایش شیوع بیماریهای مرتبط با HTLV-1 در کشور، پیشگیری و دستیابی به درمان مؤثر ضروری میباشد. هدف از مطالعهی حاضر، طراحی و تولید HTLV-1-پروتئاز متصل به قطعه Fcγ1 از آنتیبادی انسانی در سیستم بیانی...
Saved in:
| Main Authors: | , , , , |
|---|---|
| Format: | Article |
| Language: | fas |
| Published: |
Isfahan University of Medical Sciences
2025-04-01
|
| Series: | مجله دانشکده پزشکی اصفهان |
| Subjects: | |
| Online Access: | https://jims.mui.ac.ir/article_32867_331edf6afb70c5018a9fbd4c12f486a3.pdf |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Summary: | مقاله پژوهشی
مقدمه: شمال شرق ایران به عنوان منطقهی بومی ویروس HTLV-1 شناخته شده است. با توجه به افزایش شیوع بیماریهای مرتبط با HTLV-1 در کشور، پیشگیری و دستیابی به درمان مؤثر ضروری میباشد. هدف از مطالعهی حاضر، طراحی و تولید HTLV-1-پروتئاز متصل به قطعه Fcγ1 از آنتیبادی انسانی در سیستم بیانی مخمر پیکیا پاستوریس و استفاده آن در طراحی مهارکنندهی پروتئاز ویروس در مطالعات آینده میباشد.
روشها: پس از طراحیسازه ژنی HTLV-1 protease:hFcγ1، ژن بهینه شده آن در محل جایگاههای آنزیمی XhoI و NotI و کتور بیانی pPICZαA وارد شد. ابتدا پلاسمید نوترکیب با روش کلرید کلسیم به باکتری E. coli TOP10F' و سپس با روش الکتروپوریشن به پیکیا پاستوریس GS115 الحاق شد. سویههای حاوی ژن نوترکیب بر روی محیط کشت حاوی آنتیبیوتیک زئوسین انتخاب و رشد داده شدند. در نهایت، به منظور تأیید بیان پروتئین نوترکیب، SDS-PAGE و وسترن بلات انجام شد.
یافتهها: در مطالعهی حاضر؛ طراحی، کلونینگ و بیان پروتئین نوترکیب HTLV-1 protease:hFcγ1 با استفاده از دو عنصر HTLV-1-پروتئاز و مولکول hFcγ1 انسانی در سیستم بیانی پیکیا پاستوریس انجام گردید. پروتئین نوترکیب HTLV-1 protease:hFcγ1 همودایمر بسیار گلیکوزیله با 3/8pI: و kDa50 :Mw است. صحت الحاق سازهی نوترکیب در وکتور بیانی pPICZαA با استفاده جفت پرایمرAOX1 و α-factor با تکثیر قطعات به اندازههای bp1388 و bp1687 تأیید شد.
نتیجهگیری: نتایج حاصل از این پژوهش، میتواند راهکاری نوید بخش جهت بکارگیری پروتئین نوترکیب HTLV-1 protease:hFcγ1 در طراحی کاندیدای مناسب برای مهارکنندهی پروتئاز ویروس و درمان بیماریهای وابسته به HTLV-1 باشد. |
|---|---|
| ISSN: | 1027-7595 1735-854X |