人神经营养素-3 受体基因的扩增及其重组腺病毒载体的构建
【目的】构建人神经营养素-3(neurotrophin-3,NT-3)受体(即酪氨酸蛋白激酶受体C, tyrosine protein kinase C, TrkC)基因重组的腺病毒表达载体。【方法】从人脑组织mRNA 中扩增TrkC 基因全长cDNA, 定向克隆于穿梭质粒pShuttle 中, 获得一个带有CMV 启动子的表达盒。再将表达盒与腺病毒骨架DNA ( Adeno-X viral DNA) 体外连接, 形成重组腺病毒质粒(pAd-TrkC)。用pAd-TrkC 转染人胚肾293 细胞后包装成 有感染能力的重组腺病毒颗粒(Adeno-TrkC)。【结果】TrkC 基因...
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| Main Authors: | , , , , , , |
|---|---|
| Format: | Article |
| Language: | zho |
| Published: |
Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University
2005-01-01
|
| Series: | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
| Online Access: | http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43585376/ |
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| author | 王俊梅 曾园山 刘然义 吴立志 黄嘉凌 黄必军 黄文林 |
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| author_sort | 王俊梅 |
| collection | DOAJ |
| description | 【目的】构建人神经营养素-3(neurotrophin-3,NT-3)受体(即酪氨酸蛋白激酶受体C, tyrosine
protein kinase C, TrkC)基因重组的腺病毒表达载体。【方法】从人脑组织mRNA 中扩增TrkC 基因全长cDNA,
定向克隆于穿梭质粒pShuttle 中, 获得一个带有CMV 启动子的表达盒。再将表达盒与腺病毒骨架DNA
( Adeno-X viral DNA) 体外连接, 形成重组腺病毒质粒(pAd-TrkC)。用pAd-TrkC 转染人胚肾293 细胞后包装成
有感染能力的重组腺病毒颗粒(Adeno-TrkC)。【结果】TrkC 基因RT-PCR 扩增产物为2 478 bp。Adeno-TrkC
经PCR 鉴定为正确重组子。【结论】应用体外连接法已构建了人TrkC 重组腺病毒表达载体, 这为进一步应用
NT-3 进行基因治疗中枢神经损伤奠定了基础。 |
| format | Article |
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| institution | Kabale University |
| issn | 1672-3554 |
| language | zho |
| publishDate | 2005-01-01 |
| publisher | Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University |
| record_format | Article |
| series | Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban |
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