人苯丙氨酸羟化酶基因克隆及其原核表达质粒的构建

人苯丙氨酸羟化酶基因克隆及其原核表达质粒的构建

[目的]克隆健康人苯丙氨酸羟化酶基因全长cDNA序列,构建并鉴定其原核表达质粒pTrcHisB/PAH。[方法]采用RT-PCR方法从人肝组织中扩增PAH基因全长cDNA,T/A克隆到pMD18-T载体中,双酶切后将cDA亚克隆入pTrcHisB载体,构建pTrcHisB/PAH质粒,经限制性内切酶鉴定并测序。[结果]人PAH基因cDNA正确克隆入pTrcHisB表达载体,与Genebank中PAH基因序列一致。[结论]成功构建pTrcHisB/PAH表达质粒,为进一步进行研究PAH蛋白表达和重组蛋白活性鉴定奠定基础。...

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Main Authors: 张志, 黄宗青, 沈琪, 刘洪涛, 邓英太, 李爱东, 周国强, 汪华侨, 何蕴韶
Format: Article
Language:zho
Published: Editorial Office of Journal of Sun Yat-sen University 2007-01-01
Series:Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban
Subjects:
苯丙酮尿症
苯丙氨酸羟化酶
克隆
原核表达质粒
Online Access:http://xuebaoyx.sysu.edu.cn/zh/article/43582154/
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