基于ERA-CRISPR/Cas12a-LFD的犀牛特异性检测技术
野生犀牛（Rhinocerotidae）种群的生存正面临极大威胁，包括栖息地减少、碎片化及偷猎等，在对打击犀牛角等非法贸易的努力中，物种的特异性检测至关重要，为了在现场就可以迅速完成犀牛源性成分鉴定，将酶促重组等温扩增（enzymatic recombinase amplification，ERA）、CRISPR/Cas12a和侧向流试纸条（lateral flow dipstick，LFD）技术相结合，研发了一种适于现场使用的犀牛特异性核酸检测方法。结果表明：该方法只能检测出5种现生犀牛特异性核酸，与其他哺乳动物核酸测试样本没有交叉反应，最低检测下限可达100 拷贝/孔，具有较好的特异性和灵...
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|---|---|
| Format: | Article |
| Language: | zho |
| Published: |
Editorial Department of Chinese Journal of Wildlife
2023-11-01
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| Series: | 野生动物学报 |
| Subjects: | |
| Online Access: | http://ysdw.nefu.edu.cn/thesisDetails#10.12375/ysdwxb.20230409 |
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| author | 王瑛 张冲 蔡一村 王鑫杰 林颖峥 冯之航 潘良文 |
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| author_sort | 王瑛 |
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| description | 野生犀牛（Rhinocerotidae）种群的生存正面临极大威胁，包括栖息地减少、碎片化及偷猎等，在对打击犀牛角等非法贸易的努力中，物种的特异性检测至关重要，为了在现场就可以迅速完成犀牛源性成分鉴定，将酶促重组等温扩增（enzymatic recombinase amplification，ERA）、CRISPR/Cas12a和侧向流试纸条（lateral flow dipstick，LFD）技术相结合，研发了一种适于现场使用的犀牛特异性核酸检测方法。结果表明：该方法只能检测出5种现生犀牛特异性核酸，与其他哺乳动物核酸测试样本没有交叉反应，最低检测下限可达100 拷贝/孔，具有较好的特异性和灵敏度。该方法可以在36.5~40.0 ℃条件下，27~30 min完成特异性识别，无需高规格的实验室环境和精密仪器，从而提供更快、更准确和更灵敏的检测方案。 |
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| institution | Kabale University |
| issn | 2310-1490 |
| language | zho |
| publishDate | 2023-11-01 |
| publisher | Editorial Department of Chinese Journal of Wildlife |
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| series | 野生动物学报 |
| spelling | doaj-art-0f5ddd8ddc9b4cc0ae882ef8b33379202025-01-14T04:07:23ZzhoEditorial Department of Chinese Journal of Wildlife野生动物学报2310-14902023-11-014479880644042039基于ERA-CRISPR/Cas12a-LFD的犀牛特异性检测技术王瑛张冲蔡一村王鑫杰林颖峥冯之航潘良文野生犀牛（Rhinocerotidae）种群的生存正面临极大威胁，包括栖息地减少、碎片化及偷猎等，在对打击犀牛角等非法贸易的努力中，物种的特异性检测至关重要，为了在现场就可以迅速完成犀牛源性成分鉴定，将酶促重组等温扩增（enzymatic recombinase amplification，ERA）、CRISPR/Cas12a和侧向流试纸条（lateral flow dipstick，LFD）技术相结合，研发了一种适于现场使用的犀牛特异性核酸检测方法。结果表明：该方法只能检测出5种现生犀牛特异性核酸，与其他哺乳动物核酸测试样本没有交叉反应，最低检测下限可达100 拷贝/孔，具有较好的特异性和灵敏度。该方法可以在36.5~40.0 ℃条件下，27~30 min完成特异性识别，无需高规格的实验室环境和精密仪器，从而提供更快、更准确和更灵敏的检测方案。http://ysdw.nefu.edu.cn/thesisDetails#10.12375/ysdwxb.20230409犀牛源性成分CRISPR/Cas12a酶促重组等温扩增侧向流试纸条 |
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