基于ERA-CRISPR/Cas12a-LFD的犀牛特异性检测技术

基于ERA-CRISPR/Cas12a-LFD的犀牛特异性检测技术

野生犀牛（Rhinocerotidae）种群的生存正面临极大威胁，包括栖息地减少、碎片化及偷猎等，在对打击犀牛角等非法贸易的努力中，物种的特异性检测至关重要，为了在现场就可以迅速完成犀牛源性成分鉴定，将酶促重组等温扩增（enzymatic recombinase amplification，ERA）、CRISPR/Cas12a和侧向流试纸条（lateral flow dipstick，LFD）技术相结合，研发了一种适于现场使用的犀牛特异性核酸检测方法。结果表明：该方法只能检测出5种现生犀牛特异性核酸，与其他哺乳动物核酸测试样本没有交叉反应，最低检测下限可达100 拷贝/孔，具有较好的特异性和灵...

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Main Authors: 王瑛, 张冲, 蔡一村, 王鑫杰, 林颖峥, 冯之航, 潘良文
Format: Article
Language:zho
Published: Editorial Department of Chinese Journal of Wildlife 2023-11-01
Series:野生动物学报
Subjects:
犀牛源性成分
CRISPR/Cas12a
酶促重组等温扩增
侧向流试纸条
Online Access:http://ysdw.nefu.edu.cn/thesisDetails#10.12375/ysdwxb.20230409
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Description
Summary:野生犀牛（Rhinocerotidae）种群的生存正面临极大威胁，包括栖息地减少、碎片化及偷猎等，在对打击犀牛角等非法贸易的努力中，物种的特异性检测至关重要，为了在现场就可以迅速完成犀牛源性成分鉴定，将酶促重组等温扩增（enzymatic recombinase amplification，ERA）、CRISPR/Cas12a和侧向流试纸条（lateral flow dipstick，LFD）技术相结合，研发了一种适于现场使用的犀牛特异性核酸检测方法。结果表明：该方法只能检测出5种现生犀牛特异性核酸，与其他哺乳动物核酸测试样本没有交叉反应，最低检测下限可达100 拷贝/孔，具有较好的特异性和灵敏度。该方法可以在36.5~40.0 ℃条件下，27~30 min完成特异性识别，无需高规格的实验室环境和精密仪器，从而提供更快、更准确和更灵敏的检测方案。
ISSN:2310-1490

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