Estudio de respuestas microambientales diferenciales en modelos celulares pretumorales y tumorales
Objetivos: Comparar los cambios inducidos por un microambiente hipóxico en células normales, pre tumorales y malignas. Métodos: Se utilizaron: la línea celular HaCaT de queratinocitos humanos no tumorales, una sublínea HaCaT pre-tumoral transducida con los oncogenes E5, E6 y E7 del virus del papil...
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| Published: |
Universidad de la República
2024-12-01
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| Series: | Odontoestomatología |
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| author | Miguel Arocena Magdalena Millán Felipe Parietti Florencia Lamela Manoela Martins Ronell Bologna-Molina Jimena Hochmann |
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Objetivos: Comparar los cambios inducidos por un microambiente hipóxico en células normales, pre tumorales y malignas.
Métodos: Se utilizaron: la línea celular HaCaT de queratinocitos humanos no tumorales, una sublínea HaCaT pre-tumoral transducida con los oncogenes E5, E6 y E7 del virus del papiloma humano 18, y la línea celular de carcinoma oral CAL-27. Fueron sometidas a un microambiente hipóxico mediante hipoxia inducida por cubreobjetos y visualizadas con el microscopio Nanolive 3D Cell Explorer Fluo y también con microscopía confocal. Para analizar cambios metabólicos y procesos de muerte celular se usaron sondas fluorescentes específicas para ATP mitocondrial y activación de caspasas ejecutoras, respectivamente.
Resultados: En normoxia, las células tumorales mostraron menos focos de heterocromatina, y en hipoxia mostraron un aumento muy marcado de focos de alta densidad en comparación con células pre tumorales y normales. En cambio, los niveles de ATP mitocondrial en hipoxia decayeron más en células tumorales que en pre-tumorales y normales. Por último, en hipoxia hubo un aumento significativo en la activación de caspasas ejecutoras en células tumorales en comparación con células pre-tumorales y normales.
Conclusiones: En conjunto, nuestros resultados muestran que las células tumorales sufren cambios más dramáticos frente a un microambiente alterado que las células pre-tumorales y normales, cambios que podrían tener roles muy importantes en determinar la evolución futura del tumor.
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| institution | Kabale University |
| issn | 1688-9339 |
| language | English |
| publishDate | 2024-12-01 |
| publisher | Universidad de la República |
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| series | Odontoestomatología |
| spelling | doaj-art-01163eb2d75245f19b900d90ca4ac1cf2025-02-11T19:14:55ZengUniversidad de la RepúblicaOdontoestomatología1688-93392024-12-0126Supl. 110.22592/ode2024nesp1e649Estudio de respuestas microambientales diferenciales en modelos celulares pretumorales y tumoralesMiguel Arocena0https://orcid.org/0000-0002-7682-4028Magdalena Millán1https://orcid.org/0000-0002-0341-5127Felipe Parietti2https://orcid.org/0000-0001-9090-7340Florencia Lamela3https://orcid.org/0000-0003-0333-0534Manoela Martins4https://orcid.org/0000-0001-8662-5965Ronell Bologna-Molina5https://orcid.org/0000-0001-9755-4779Jimena Hochmann6https://orcid.org/0000-0002-0875-2333Facultad de Odontología, Udelar. Facultad de Odontología, Udelar. Facultad de Odontología, Udelar. Facultad de Odontología, Udelar. UFRGSFacultad de Odontología, Udelar. Facultad de Odontología, Udelar. Objetivos: Comparar los cambios inducidos por un microambiente hipóxico en células normales, pre tumorales y malignas. Métodos: Se utilizaron: la línea celular HaCaT de queratinocitos humanos no tumorales, una sublínea HaCaT pre-tumoral transducida con los oncogenes E5, E6 y E7 del virus del papiloma humano 18, y la línea celular de carcinoma oral CAL-27. Fueron sometidas a un microambiente hipóxico mediante hipoxia inducida por cubreobjetos y visualizadas con el microscopio Nanolive 3D Cell Explorer Fluo y también con microscopía confocal. Para analizar cambios metabólicos y procesos de muerte celular se usaron sondas fluorescentes específicas para ATP mitocondrial y activación de caspasas ejecutoras, respectivamente. Resultados: En normoxia, las células tumorales mostraron menos focos de heterocromatina, y en hipoxia mostraron un aumento muy marcado de focos de alta densidad en comparación con células pre tumorales y normales. En cambio, los niveles de ATP mitocondrial en hipoxia decayeron más en células tumorales que en pre-tumorales y normales. Por último, en hipoxia hubo un aumento significativo en la activación de caspasas ejecutoras en células tumorales en comparación con células pre-tumorales y normales. Conclusiones: En conjunto, nuestros resultados muestran que las células tumorales sufren cambios más dramáticos frente a un microambiente alterado que las células pre-tumorales y normales, cambios que podrían tener roles muy importantes en determinar la evolución futura del tumor. https://odon.edu.uy/ojs/index.php/ode/article/view/694microambiente hipóxicocélulas tumorales y pre-tumorales |
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